金太阳邯郸市2024高二第二学期期末考试(24-576B)生物答案

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限制酶识别序列-PA基因引物a引物c和切割位点Sma I Xma I↓Bgl IIBgl II AGATCTPCR1引物b引物d-Nhe ImlacZNhe I GCTAGCPCR2PCLY11Sma I CCCGGG产物ABXma I CCCGGG产物CDneor:新霉素抗性基因5重叠延伸AB上链3-13→重组质粒CD下链PCR3CCGG突变产物CTAGtPA改良基因t-PA改良基因(1)科学家将tPA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,生产出性能优良的t-PA突变蛋白的生物技术手段属于范畴。该工程的基础是(2)获得性能优良的tPA突变蛋白的正确顺序是(选择正确编号并排序)。①t-PA蛋白功能分析和结构设计②借助定点突变改造t-PA基因序列③检验t-PA蛋白的结构和功能④设计t-PA蛋白氨基酸序列和基因序列⑤利用工程菌发酵合成t-PA蛋白(3)已知t-PA蛋白第84位是半胱氨酸,相应的基因模板链(图中t-PA基因的上链)上的碱基序列是ACA,丝氨酸的密码子是UCU。重叠延伸PCR示意图中的黑点便是突变部位的碱基,引物b中该突变位点的碱基是,引物c中该突变位点的碱基是(4)据图可知,PCR3时,需要的引物是引物的作用是。若扩增图中序列时引物选择正确,PC承操作过程没有问题,但对产物进行电泳时,发现除了目标序列外还有很多非特异性条带,请分析出现此情况的原因(5)若获得的t-PA突变基因如图所示,那么质粒pCLY11需用限制酶切开,才能与tPA突变基因高效连接。【答案】(1)①.蛋白质工程②.基因工程(2)①④②⑤③(3)①.G#鸟嘌呤②.C#胞嘧啶(4)①.引物a和引物d②.使DNA聚合酶从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸③.退火(复性)温度过低、引物特异性不高(5)Xmal、BglΠ【解析】【分析】1、基因工程技术的基本步骤:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。第21页/共22页
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