贵州省2024届高三10月联考(10.28)生物试卷答案

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23.(11分)千燥综合征(SS)是临床常见的一种自身免疫病,其血清中存在多种抗体,其中以SSB抗体特异性最强,影响最显著。科研人员为建立抗SSB抗体全自动定量检测的磁微粒化学发光试剂,利用基因工程技术获得重组SSB蛋白,流程如下,请分析回答:EcoRIkan'EcoRIPET41a质粒注射catBamHIkan'PET41a-SSB②重组质粒大肠提取→杆菌纯化←BamHIEcoRIcatRNA9cDNA一→S☐FCR囚SSB基因SSB基因Xhol注:Xhol、BamHI、EcoRI表示限制酶,kant cat分别表示卡那霉素抗性基因和氯霉素抗性基因(I)利用RNA通过①过程获得cDNA需要」▲酶。通过PCR技术扩增SSB基因的前提是要测定该基因两端部分核苷酸序列,目的是▲■(2)为确保与PET41a质粒定向连接,获得的SSB基因两端要含有」酶切位点。在PCR过程中,第▲轮循环产物中出现含所需限制酶的片段A。(3)获得含SSB基因的重组质粒后,进行如下实验切割限制酶EcoRIBamHⅡ和Xhol原质粒和重组质粒,获得片段大小如右表(1kb=1000碱基对)(注意:DNA片段大小与图中所画比例一原质粒8.1kb2.7kb、5.4kb致)。SSB基因的长度为▲。重组质粒3.4kb、5.0kb未做该处理(4)③过程目的是将重组质粒转染到大肠杆菌内,并接种于添加▲的培养基上,收集菌落进行鉴定,将阳性菌落进一步纯化后将菌体破碎处理,筛选得到重组SSB蛋白。(5)为检测重组质粒表达情况及重组蛋白与抗体结合能力,科研人员通过注射含纯化的重组SSB蛋白的弗氏佐剂进行如下实验,请完成下表:实验步骤实验操作分组取健康、生理状态相同的小鼠随机均分成两组。实验处理实验组注射含纯化的重组SSB蛋白的弗氏佐剂,对照组①连续三次。饲养在相同且适宜环境中饲养。②▲第三次免疫后第七天取小鼠血清并提取抗体进行检测。与对照组相比,若抗体检测呈③▲一,则表明重组SSB蛋白具有与相应抗体高结果分析度结合的能力。高三生物学第7页共8页
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